一、参赛目的:
促进高职学生了解鸡新城疫抗体水平测定的内容,熟练掌握测定方法,提高检测水平,培养学生的团队合作能力,不断提升学生的职业能力;适应畜牧业行业现状及技术发展趋势,促进畜牧兽医专业建设与教学改革;推进学院与相关企业深度合作,更好的实现工学结合的人才培养模式,为畜牧兽医行业培养高素质的技术技能型人才。
二、参赛内容
本次竞赛活动由陕西省教育厅主办、杨凌职业技术学院承办全省各高职院校参加。内容为鸡新城疫抗体水平测定(微量法)。测定方法参考《新城疫诊断技术》(GB/T16550—2008)标准,具体分为6个部分。竞赛总时间为180分钟。
1.试验器材准备(占总成绩的6%)
按照操作规程进行试验器材的准备,并进行标识,合理摆放。
2.配制1%鸡红细胞悬液(占总成绩的20%)
按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液。
3.血凝(HA)试验(占总成绩的16%)
按照操作规程,用微量移液器在96孔V型血凝反应板上滴加稀释液、新城疫标准抗原,充分混匀后倍比稀释,添加1%鸡红细胞悬液,充分振荡和感作,正确判定抗原的血凝效价。
4.配制四单位病毒(占总成绩的15%)
根据HA试验测定结果,按照操作规程配制四单位病毒。
5.血凝抑制(HI)试验(占总成绩的16%)
按照操作规程,对10个被检血清进行血凝抑制试验操作,同时设新城疫标准阳性血清对照和阴性血清对照。
6.抗体滴度报告(占总成绩的27%)按照操作规程正确读数,填写完成报告单。
三、参赛人员:从生物工程系2017、2018、2019级畜牧兽医专业全体学生。
四、报名时间:10月8-10月9 日各班班长处报名交畜牧生计教研室王珊老师处。
五、指导教师: 周清发 王珊
五、赛前准备:
(一)强化训练(10月10日—— 16 日)
(二)比赛时间 10月17日
六、赛后奖励:本次大赛设一、二、三等奖,一等奖10%,二等奖20%,三等奖30%。
生技畜牧教研室
2019年10月8日
附:鸡新城疫抗体水平检测技能大赛考核标准
表3 项目技能竞赛评分标准
序号 |
考核内容 |
考核要点 |
分值 |
评分标准 |
1 |
试验器材准备 (8分) |
仪器使用与 材料准备 |
2 |
仪器正确使用,1分; 材料准备到位,1分。 |
物品标识 |
4 |
不标示不得分; 标识合理,2分; 标示清晰,2分。 注:缺一个器皿未标注,扣0.5分,扣完2分为止。 |
实桌面整洁度 |
2 |
摆放合理,2分; 酌情扣分。 |
2 |
配制1%鸡红细胞悬液(18分) |
采血方法 采血量 |
6 |
抗凝剂适量,2分; 采血方法规范、熟练, 2分; 采血量控制在2-4mL之间(每超1mL,扣1分)2分。 注:鸡未保定好,扣1分;采血前未消毒扣1分;血液与抗凝剂比为4:1,差异较小扣1分,差异较大扣2分;采血未一针见血,每多加一针扣0.5分;未用干棉球按压止血,扣1分;采血未成功的,扣6分等。以上细节累加,6分扣完为止。 |
离心机使用 |
4 |
离心机使用规范,4分。 注:未做好平衡扣2分,平衡时未加套管等,各扣1分,累积扣完4分为止。 |
红细胞悬液配制方法 |
8 |
稀释液倍数正确(离心时原抗凝血的3-4倍稀释,稀释后每管最大不可超过12mL),2分; 离心机转数、离心时间正确(2000 r/m,5-10 min),2分; 洗涤次数适宜,2分; 压积红细胞吸取正确,2分。 注:最后配置1%红细胞为10-20 mL,每超过10 mL扣1分,最多扣2分。 |
3 |
血凝试验 (20分) |
器材使用 |
4 |
微量移液器使用规范,2分; 枪头更换操作符合规范,2分。 注:加枪头时操作规范,不可用力撞击枪盒,移液枪垂直加样为规范,倾斜角度不要过大,否则酌情扣分。 |
操作程序 |
6 |
及时换枪头,2分; 加样顺序正确,1分; 倍比稀释操作规范,1分; 震荡及感作时间得当(可以使用振荡器,以液体不震出来为准),2分。 |
结果判定准确 |
10 |
生理盐水对照孔的RBC呈明显钮扣状沉到孔底时判定结果,4分; 对照孔结果正确,能确定完全凝集的新城疫标准抗原最高稀释倍数,4分; 能把完全凝集的病毒的最高稀释倍数作为1个血凝单位,2分。 注:读数时,有跳孔现象的,每跳1孔扣2分。 |
4 |
配制四 单位 病毒 (10分) |
器材选择 |
4 |
器材选择合理,2分; 使用规范、熟练,2分。 |
配制方法 |
4 |
稀释倍数计算正确,2分; 稀释液加入得当、操作规范,2分。 |
配制量适宜 |
2 |
配制量适宜,2分; 注:配置量10-20 mL为适量,每超过10 mL扣1分,最多扣2分。 |
5 |
血凝抑制试验 (20分) |
器材使用 |
4 |
器材使用规范、熟练,4分; 酌情扣分。 |
操作程序 |
6 |
96孔V型微量反应板各孔加入的稀释剂正确,1分; 被检血清、新城疫标准阴性血清对照、标准阳性血清对照加入正确(参照国标,每缺一个对照扣1分),2分; 感作时间适宜(以国标为准,时间不正确扣2分),2分;枪头更换正确,1分。 |
结果判定准确 |
10 |
能在生理盐水对照孔红细胞呈明显钮扣状沉淀到孔底时判定结果,2分; 在对照孔结果正确情况下,能从背侧观察RBC有无呈泪珠样流淌,2分; 能把完全不凝集(RBC完全流下)作为被检血清的最高稀释倍数,3分; 阴性血清与标准对照的HI滴度不大于2log2,阳性血清与标准抗原对照的HI滴度与已知滴度相差1个稀释度范围内,3分。 |
6 |
抗体滴度报告 (24分) |
抗体滴度报告 |
2 |
抗体滴度报告方式正确,2分; 注:若超过10孔,应写成≥10log2。 |
结果误差 |
20 |
每个样本1分,共20个样本,结果误差±1,得1分;误差超过±1,0分。 |
场地整洁度 |
2 |
场地整洁,2分 注:若移液枪未调到最大量程,其他仪器和器皿未复位;注射器未放入废物缸等,每错1项扣1分,扣完为止。 |
总分 |
100 |
|